浮游菌檢測標準操作規程SOP
目 的：建立潔凈（區）室浮游菌檢測標準操作規程。
范 圍：適用于潔凈（區）室浮游菌監測。
責 任：QC人員負責實(shí)施，QA人員負責監督。
內 容：
1取樣前準備工作：
1.1 依據檢測區域的取樣點(diǎn)數，按照《培養基配制、滅菌標準操作程序》制備適量的營(yíng)養瓊脂培養基。
1.2 在超凈工作臺內，以無(wú)菌操作法將配制好的營(yíng)養瓊脂培養基以每皿約15ml的裝量分裝，待培養基凝固后移出潔凈區。
1.3 將制備的營(yíng)養瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養箱內于30～35℃培養48小時(shí)。取出逐個(gè)檢查，確認無(wú)菌落數后即可使用。
1.4采樣：將上述制備好的營(yíng)養瓊脂平皿交與QA人員取樣。
2.儀器、設備和培養基：
2.1所用的儀器、設備和培養基：
2.1.2 浮游菌采樣器
2.1.3培養皿（φ90mm×15mm）
2.1.4 培養基（營(yíng)養瓊脂培養基）
2.1.5恒溫培養箱
2.2 儀器、設備、培養基的要求：
2.2.1 浮游菌采樣器：
2.2.1.1 浮游菌采樣器必須要有流量計和定時(shí)器。
2.2.1.2 應嚴格按儀器說(shuō)明書(shū)的要求進(jìn)行操作。
2.2.1.3 采樣器必須按儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定，以保證測試數據的可靠性，檢驗項目有：定時(shí)器，轉盤(pán)轉速，流量計。
| 文件名稱(chēng) | 浮游菌檢測標準操作規程 | 頁(yè) 次 | 共4頁(yè) 第2頁(yè) |
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1.2.1.4 每次測試前應先接通電源，啟動(dòng)真空抽氣泵，然后調節流量計和定時(shí)器。
2.2.1.5 空氣采樣量根據需要選定，已知采樣器的流量（L/min）,設定采樣時(shí)間（min）兩者相乘即得采樣量（L）。
2.2.1.6 采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩定的材料制造，采樣管?chē)澜麧B漏，內壁應光滑，采樣管的長(cháng)度應根據測定點(diǎn)的高度定，盡量減少彎曲。
3. 測試方法：
3.1 測試用儀器、培養皿表面必須嚴格消毒。
3.1.1 采樣器進(jìn)入被測房間前先用消毒劑滅菌。
3.1.2 用消毒劑擦凈培養皿的外表面。
3.1.3 采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂盤(pán)、轉盤(pán)以及罩子的內外面，采樣結束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤(pán)。
3.1.4 采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌，如用消毒劑對采樣管的外壁、內壁進(jìn)行消毒，應將管中的殘留液倒掉并晾干。
3.1.5 采樣者應穿戴與被測潔凈區域相應的工作服，在轉盤(pán)上放入或調換培養皿前，雙手用消毒劑消毒。
3.2 采樣程序：
3.2.1 儀器經(jīng)消毒后先不放入培養皿，開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調好流量、轉盤(pán)轉速。
3.2.2 關(guān)閉真空泵，放入培養皿，蓋上蓋子后調節采樣品縫隙高度。
3.2.3 置采樣器于采樣點(diǎn)后，開(kāi)啟采樣器、轉動(dòng)定時(shí)器，根據采樣量設定
采樣時(shí)間。
4 測試規則：
4.1 測試狀態(tài)：
4.1.1 浮游菌測試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過(guò)。
4.1.2 測試狀態(tài)為靜態(tài)測試，并在報告中注明測試狀態(tài)。
4.2 測試人員：
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4.2.1 測試人員必須穿戴符和被測環(huán)境級別的工作服。
4.2.2 靜態(tài)測試時(shí)，室內人員不得多于2人。
4.3 測試時(shí)間：
4.3.1 對單向流，測試應在凈化空調系統正常運行不少于10min后開(kāi)始。
4.3.2 對非單向流，測試應在凈化空調系統正常運行不少于30min后開(kāi)始。
4.4 zui少采樣點(diǎn)數目及其布置，zui小采樣量，見(jiàn)下表:
| 面積（m2） | 潔凈度級別 | |||||
| A | B | C | ||||
| 驗證 | 監測 | 驗證 | 監測 | 驗證 | 監測 | |
| ＜10 | 2～3 | 1 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥10～＜20 | 4 | 2 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥20～＜40 | 8 | 3 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥40～＜100 | 16 | 4 | 4 | 1 | 2 | -- |
| ≥100～＜200 | 40 | -- | 10 | -- | 3 | -- |
| ≥200～400 | 80 | -- | 20 | -- | 6 | -- |
| 400 | 160 | -- | 40 | -- | 13 | -- |
4.4.1 工作區測點(diǎn)位置離地0.8m～1.5m左右，送風(fēng)口測點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)面30cm左右；可在關(guān)鍵設備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測點(diǎn)。
4.4.2 每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次
4.4.3 對于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應正對氣流方向；對于非單向流，采樣管口向上。
4.4.4布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應離開(kāi)塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。
4.4.5采樣時(shí)，測試人員應站在采樣口的下風(fēng)側。
5 培養：取樣結束后將平皿復倒置隔水式恒溫水浴培養箱內于30～35℃培養48小時(shí)。并以未采樣的營(yíng)養瓊脂平皿作對照皿。
6菌落計數：
6.1用肉眼直接計數，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否遺漏。
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6.2 若培養皿上有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重疊，可分辨時(shí)，仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計數。計數：培養結束，將上述培養后的平皿取出，逐個(gè)點(diǎn)計菌落數，必要時(shí)用放大鏡檢查，并記錄。
7 結果計算：
7.1 平均菌落數的計算見(jiàn)下式：
平均菌落數 m=
式中：m為該房間（或區域）的平均菌落數；
m1、m2‥‥‥mn為該房間（或區域）各取樣點(diǎn)的菌落數；
N為培養皿總數
8 結論：
8.1 潔凈室（區）內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準。
8.2 若某潔凈室（區）的平均菌落數超過(guò)評定標準，則必須對此區域先行消毒，然后重新測試兩次，測試結果必須合格。
